Spectre d'absorption de la chlorophylle brute - Protocole

L'absorbance A (sans unité) d'une solution caractérise sa capacité à absorber des radiations d'une longueur d'onde donnée. Elle est mesurée à l'aide d'un spectrophotomètre.

Principe du spectrophotomètre

Un prisme monochromateur décompose la lumière blanche en ses différentes radiations selon leur longueur d'onde. Ces radiations traversent alors la cuve et un capteur mesure l'absorbance de la solution testée.

Matériel

• Une solution de chlorophylle brute.
  
• Un spectrophotomètre.
  
• Une cuve.
  
• De l'alcool à 90° (pour étalonner le spectrophotomètre).
  

Étapes

1. Étalonner le spectrophotomètre en plaçant la cuve contenant de l'alcool à 90°.

2. Placer la cuve contenant la solution de chlorophylle brute.

3. Mesurer l'absorbance pour différentes longueurs d'ondes, entre 400 et 800 nm, tous les 50 nm par exemple.

4. Remplir la feuille de calcul « Absorbance - Fichier tableur » avec les résultats obtenus et tracer le graphique correspondant (graphique de type nuage de points avec courbes lissées et marqueurs).